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為了解全球非洲豬瘟流行形勢,正確認識非洲豬瘟的病原學和流行病學特征,防止非洲豬瘟在我國進一步擴散和傳播,本文簡明闡述了非洲豬瘟特有的病原學特征、主要感染源、傳播途徑以及監測技術要點,分析了需特別關注的4種傳染源,供相關人員參考,以便及早根除國內的非洲豬瘟疫情,保障我國養豬業健康發展。
2018年8月3日,沈陽市沈北新區某豬場證實發生ASF疫情。這是我國**發生ASF。此次疫情引起了國內外高度關注。如何正確認識ASFV病原學特征和流行規律成為當務之急。本文結合國內外ASF研究進展,闡述了ASFV病原學特征、流行病學特征、診斷要點,分析了國內需要特別關注的幾種傳染源,以期為采取有效措施,防范、控制和清除ASF提供參考。
全球ASF流行概況
全球ASF流行大體可以分為三個階段。
**階段,主要在非洲大陸暴發和流行。1921年,非洲肯尼亞**早報道ASF發生,隨后非洲南部、中部和東部先后發生ASF疫情,**今非洲中南部仍是非洲豬瘟的主要疫區。
第二階段,ASF傳出非洲大陸進入歐洲和南美洲。1957年ASF**傳出非洲大陸,在葡萄牙的里斯本地區發生。隨后西班牙、法國、意大利、荷蘭等西歐**陸續發生ASF疫情。通過撲殺等措施,到20世紀90年代,除意大利撒丁島外,歐洲基本清除了ASF。1971年南美洲的古巴**報道ASF,隨后巴西、多米尼加等國也報道有ASF疫情發生。
第三階段,ASF傳入東歐和俄羅斯。2007年ASF經輪船泔水長距離傳播**東歐的格魯吉亞,繼而傳播到阿塞拜疆、亞美尼亞、波蘭、立陶宛、白俄羅斯、俄羅斯等,**今仍在局部暴發和流行。2018年以來,中東歐**通報發生的ASF疫情就有2710起。2017年俄羅斯通報發生160起ASF疫情,其中俄羅斯遠東地區發生疫情的伊爾庫茨克州還是重要的商貿樞紐,與我國的交通貿易非常頻繁,對我國形成了極大威脅。
ASFV特有的病原學特征
存活時間長,抵抗力強
ASFV屬于雙鏈DNA病毒目非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬。該屬目前僅有一個ASFV病毒種。ASFV的基因組為單分子線狀DNA,長度約170~190kb。ASFV個體較大,直徑可達200nm,表面為二十面體結構和一層含類脂的囊膜,因此高溫和一些破壞囊膜的消毒劑均可有效殺滅ASFV。但是由于其復雜的分子結構,ASFV對消毒劑的抵抗力較其他的囊膜病毒稍強,特別是在一些豬肉制品或血液中存活時間更長。據報道,ASFV在干腌火腿中的感染性可持續140d,在帕爾馬火腿中的感染性可持續300~399d,在血液、糞便和組織中存活時間長達半年,在生肉或者未完全煮熟的豬肉制品中存活時間長達3個月。這就導致ASFV一旦傳入,往往在疫源地長期存在,造成二次或次級感染。
基因組龐大,易變異
ASFV基因組龐大,且差異較大。有的毒株致病性很強(E75),有的則較弱(細胞適應毒BA71V)。研究發現,在ASFV基因組的保守區,不同毒株的左端48kb和右端22kb存在較大差異,這可能是ASFV毒力存在差異較大的主要原因。與痘病毒和虹彩病毒類似,ASFV也屬于細胞質內增殖的病毒。到目前為止,已經測定**少11株ASFV的全基因組序列,分析其結構發現,ASFV基因組**少含有151~167個ORFs,**少110個ORFs在11株ASFV中都高度保守。在ASFV的包裝和侵染過程,**少有pp220、pp62、p72、p54、p30、CD2V、p10、p14.5、p17等50種蛋白參與。其中pp220分子質量為281.5ku,在病毒感染過程中屬于晚期表達蛋白,由基因CP2475L編碼,在S273R酶的作用下裂解為p150、p37、p14和p34等成熟的病毒蛋白;pp62的分子質量為60.5ku,由基因CP530R編碼,在S273R酶的作用下裂解為p35和p15等成熟的病毒蛋白;p150、p37、p14、p34、p35和p15等蛋白在病毒衣殼的組裝過程中起關鍵作用。P72的相對分子質量為73.2ku,由基因B46L(VP72)編碼,是病毒的主要結構蛋白和核心抗原蛋白,是病毒二十面體的主要成分。
目前很多檢測ASFV的PCR、熒光PCR方法等都是基于VP72基因建立的。研究顯示,ASFV的基因組變異非常頻繁,根據編碼p72基因的C端序列可以將ASFV**少分為24個基因型,進一步根據p54和PB602L基因的**可變區(CVR)序列,ASFV的分型數量會更多。
ASFV主要感染源與傳播途徑
ASFV宿主是家豬和野豬,主要通過間接和直接接觸傳播。發病豬、隱性感染豬及其排泄物和污染物以及軟蜱等媒介吸血昆蟲都是ASFV的傳染源,這也是ASF不易清除的主要原因。
軟蜱
在非洲,野豬-軟蜱-野豬形成的“森林循環”比較常見。一些疣豬ASF感染率較高,軟蜱叮咬后,病毒可長期在軟蜱體內存活,再通過叮咬野豬進入下一個循環,從而導致“森林循環”長期穩定存在。
野豬
野豬與家豬的接觸是ASFV的另一個重要的傳染源。野豬在野外適應性很強,喜歡高密度群居生活,導致野豬之間很容易通過直接接觸傳播本病。有些野豬還經常出沒于農戶田舍周圍,與家豬接觸密切。一旦ASFV在野豬中定殖,則會形成一個移動傳染源,加上野豬活動性隱蔽,活動范圍大,短期內很難清除。
餐余垃圾及非生物媒介
帶毒的餐余垃圾是一個很重要的感染源。巴西、葡萄牙等**暴發的ASF疫情都是有交通工具攜帶的餐余垃圾喂豬引起的。此外,一些污染的衣服、鞋子、車輛、設備等非生物媒介也可以傳播ASFV。
ASFV監測與滅源
由于ASFV在外界環境中存活時間長,對普通消毒劑抵抗力強,病毒基因型多,易變異,無有效疫苗預防,因此ASF在沈陽市的暴發,對我國養豬業是一種巨大威脅。考慮到ASFV的潛伏期長達15d,再加上現代發達的物流業,15d的時間足以讓處于潛伏期內的豬到達國內所有地區,造成疫情大面積擴散和傳播。另外,ASFV的傳播方式多樣,當前尚無有效疫苗,因此國內防控本病的**主要措施就是監測和滅源。
監測要點
臨床檢查。ASF根據臨床表現可以分為**急性、急性、亞急性和慢性等4種類型。**急性非洲豬瘟往往不表現典型癥狀,有時豬剛出現精神沉郁、飲食下降后,第2~3天就突然死亡。急性非洲豬瘟在臨床上的表現主要是高燒,肢體末端出血性紫斑,病理變化為主要臟器的出血和淋巴結腫大,如脾臟嚴重腫大出血、肺臟腫大出血、膀胱出血、心內膜出血、胃和腸黏膜出血,頜下淋巴結、腹腔淋巴結、腸系膜淋巴結等腫大出血。臨床上一頭豬不一定能全部顯現出所有癥狀,但多剖檢幾頭基本上可以看到這些癥狀。因此,在臨診上排除ASF疑似病例時要慎重,不可輕易放過**一個可疑病例。另外,ASF很容易與古典豬瘟和高致病性豬藍耳病引起的病變相混淆,所以在臨床診斷和病理剖檢時要注意鑒別。
實驗室檢測。目前,如果臨床上發現類似豬瘟或者高致病性豬藍耳病病例時,一定要進行ASF排查,一旦發現可疑樣品,就必須進行實驗室檢測。現有的實驗室檢測方法主要有血清學方法和病原學方法。血清學方法主要有間接酶聯免疫吸附試驗、阻斷酶聯免疫吸附試驗和間接熒光抗體試驗等,其中酶聯免疫吸附試驗已經有商品化的試劑盒出售。
ASFV的病原學方法也有很多,如病毒的細胞培養和分離、直接免疫熒光法、雙抗體夾心ELISA法、普通PCR和熒光PCR方法等,其中OIE推薦的普通PCR和熒光PCR方法**為常用。我國《非洲豬瘟防治技術規范(試行)》中提到了3種ASFV病原學檢測方法:雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗、聚合酶鏈式反應和實時熒光聚合酶鏈式反應(OIE官方網站都有這些方法詳細操作步驟)。除此以外,還要加大ASF防控技術研制工作力度,盡快開發簡易、**、特異的診斷試劑和診斷方法,并能夠與古典豬瘟、高致病性豬藍耳病等其他豬群疫病相鑒別。
需特別關注的幾種傳染源
用來喂豬的泔水。泔水是來自城市的飯店、餐館、工廠餐廳等的餐余垃圾。一直以來,泔水喂豬作為處理餐余垃圾的方法很受小型養殖戶歡迎。這種養殖模式在部分城市城鄉結合部較多,感染疫病風險**。如果飯店中使用的豬肉攜帶ASFV,由于病毒存活時間較長,ASFV就會隨泔水飼喂而感染豬群,因此泔水是傳播ASFV的重要傳染源。
屠宰場。如果感染ASFV的病豬進入待宰間,會通過糞便、尿液以及直接接觸等將ASFV傳遞給健康豬群并能在待宰間長期存在。當感染ASFV的豬進入屠宰間后,屠宰時產生的糞便、血液等會污染屠宰間,屠宰中使用的刀具、車間流水間、屠宰工人等都可以使豬肉制品污染ASFV,從而使屠宰場成為ASFV的傳染源。
生豬肉制品。ASFV可在生肉或者未完全煮熟的豬肉制品中存活3個月,一旦污染豬肉,則會通過銷售而污染其他生豬肉,從而導致病毒向外傳播,并通過泔水飼喂感染健康豬群,導致疫情發生。
生豬販運人或經紀人。一些小型養殖戶經常任由豬販子或經紀人到自己豬場選豬。這些人在不同的豬場和豬舍內隨意來回走竄,導致病原在不同的豬場之間相互傳播。
小結
ASFV在外界環境中存活時間長,對普通消毒劑抵抗力強,導致難以清除;病毒基因型多,易變異,導致無有效疫苗預防;感染源和傳播途徑多,可長距離傳播,導致防控難度大。因此防控本病的**主要措施就是監測和滅源。需要通過嚴格控制泔水喂豬以及屠宰場、生豬肉制品、生豬販運人或經紀人等4種傳染源,防止疫情擴散;通過臨床和實驗室診斷技術研發與培訓,加強監測,及早發現疫情。